1. 研究目的与意义
内容:(1)建立离体肝灌流模型(2)应用离体肝灌流法收集肝灌流液(3)采用LC-MS/MS法分析肝灌流液中Liguzinediol及代谢产物 研究意义: Liguzinediol化学名为2,5-二羟甲基-3,6-二甲基吡嗪,是对川芎嗪结构修饰、分离、纯化得到的水溶性单体化合物。
药理研究表明Liguzinediol具有明确的正性肌力作用,可能与细胞膜上的新型钙离子通道介导有关,并且在大剂量下未见心律失常现象,与常规治疗窗小、中毒剂量与有效剂量接近的强心药物相比具有明显优势。
虽然Liguzinediol药效显著,但其代谢途径以及代谢酶尚不明确,本文应用离体肝灌流法确证其是否在肝脏有代谢过程,为推测其代谢路径及深度研发提供依据。
2. 文献综述
药物体外肝代谢方法研究进展戚华文(南京中医药大学药学院11药学2班 042011238)摘要:对近几年的文献资料进行分析、综合、归纳。
介绍肝微粒体温孵法、肝细胞体外温孵法、肝细胞体外温孵法、肝组织切片法、离体肝脏灌流技术和基因重组肝CYP450酶系统体外实验。
其中,离体肝脏灌流法是本文介绍的重点。
3. 设计方案和技术路线
研究方案与技术路线Krebs-Henseleit缓冲液的制备 贮备液A:精密称取0.141 g MgSO4,0.16g KH2PO4,0.35 g KCl,6.9 g NaCl和2.1 g NaHCO3置于100 mL容量瓶中,蒸馏水定容至刻度。
贮备液B:精密称取2 g D-Glu置于100 mL容量瓶中,蒸馏水定容至刻度。
贮备液C:精密称取0.373 g CaCl2置于100 mL容量瓶中,蒸馏水定容至刻度;以上贮备液均置于4℃ 冰箱贮存。
4. 工作计划
研究进度: 2022.01~2022.02 查阅文献,了解肝灌流模型的建立以及 Liguzinediol的药理。
2022.02~2022.03 结合所查阅的文献,完成开题报告和综述,作好实验准备。
2022.03~2022.05 利用离体肝灌流法研究Liguzinediol的体外代谢。
5. 难点与创新点
本实验首次应用离体肝灌流模型进行Liguzinediol的体外代谢研究,建立Liguzinediol及其体外代谢产物的LC-MS/MS测定方法,该方法具有灵敏度高、专属性强、准确可靠等特点。
