1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
意义: 菊花原产我国,是我国十大传统名花和世界四大切花之一,观赏和经济价值很高,菊花的花色、花型等观赏性状的研究是菊花育种中十分重要的一个方面。
TCP家族是在植物形态发育和进化中起着重要作用的一类转录因子,一般在快速生长的组织或器官中表达,参与花的形态建成和对称性发育,影响侧生分生组织的生长和发育,对雄蕊的形成模式进行调控。
通过对菊花中TCP家族基因的研究,可以了解其在菊花花形态建成中的作用和分子机理,为菊花观赏性状的分子育种提供分子基础。
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2. 研究的基本内容和问题
研究目标:(1)克隆获得TCP基因的全长 研究内容:(1)从材料中提取RNA,反转录,获得cDNA序列。
(2)从转录组库中筛选TCP相关基因,利用所得基因设计特异引物,经过RT-PCR扩增,电泳检测并回收,纯化后连接载体,转化大肠杆菌,挑选阳性克隆,摇菌测序。
获得TCP基因的中间序列。
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3. 研究的方法与方案
研究方法:(1)跑RT-PCR、巢式PCR获得TCP基因全长 技术路线:菊花花瓣RNA的提取→反转录→中间序列→3-UTR→5-UTR→基因全长 实验方案:(1)从材料中提取RNA,用B26dT进行反转录,获得cDNA序列。
(2)从转录组库中筛选TCP相关基因,利用所得基因设计特异引物,经过RT-PCR扩增,电泳检测并回收,纯化后连接载体,转化大肠杆菌,挑选阳性克隆,摇菌测序。
获得TCP基因的中间序列。
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4. 研究创新点
研究内容有创新:有关菊花基因工程的研究已有许多报道。
如在菊花上成功地转化并得到表达的有选择报告基因、花色调节基因、花期调节基因、株型调节基因、抗病虫基因、以及抗灰霉病基因和抗病毒病基因等。
但是,花瓣形态方面的研究却鲜见报道。
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5. 研究计划与进展
2014年10月2015年2月 获得TCP基因全长 2011年3月2011年5月 完成毕业论文
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