1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
脂肪酸钙是油脂水解所得的脂肪酸经皂化反应制得的钙盐。脂肪酸钙不溶于水，在胃酸（HCl）的作用下，分解成脂肪酸和钙离子，钙离子进而与HCl结合成可溶性氯化钙，生物利用度高[1]。脂肪酸钙到达反刍动物瘤胃时，不易被微生物降解，可起到避免脂肪干扰瘤胃微生物分解纤维素的作用。因此，脂肪酸钙是一种专门用于反刍动物的高能饲料产品，有效能值高，具有过瘤胃保护特性。脂肪酸钙作为高能量添加剂在反刍动物及家禽上应用广泛。比如，泌乳早期奶牛日粮补充脂肪酸钙，通过提高胰岛素和IGF-1浓度，降低GC和瘦素浓度，促进血清葡萄糖高效利用，降低酮体生成，调节泌乳早期奶牛体内脂肪代谢，提高泌乳性能，改善乳品质[2]；肉鸡日粮添加脂肪酸钙，与添加油脂相比，在满足能量需求的同时，脂肪酸钙中的钙进入体内会使油脂平衡向吸收方向移动，既能有效地使脂肪转变为供动物生长的能量，又能促进钙的吸收，使鸡皮坚实，羽毛光亮，且易拔除，使肉鸡外观好，提升肉鸡商品价值[3]。
张海波[2]研究发现，泌乳早期奶牛饲料中添加200g/d脂肪酸钙，泌乳量（单位：kg/d）从23.95±2.71增加至26.65±2.70，产奶效率从1.20±0.18增加至1.35±0.15，乳脂率（单位：%）从3.48±0.10增加至3.73±0.31；李国庆等[4]研究发现，育肥绵羊日粮分别添加20/40/60g/d脂肪酸钙，日增重分别提高27.58%、50.36%、48.28%，且添加40g/d最为经济；李千军等[5]研究发现，育肥猪饲粮中添加1.43%大豆脂肪酸钙，育肥猪日增重提高15g，日采食量降低0.06kg，料重比降低5.56%；高士争[6]研究发现，蛋鸡日粮添加5%脂肪酸钙，可以使产蛋率提高8%，破蛋率下降1.3%，日采食量降低，腹部脂肪沉积减少。
蛋鸡日粮添加油脂能够提供高能量、必需脂肪酸、促进脂溶性维生素的吸收，提高机体的抗热应激能力，同时提高日粮的适口性，降低饲料的粉尘[7]。由于脂肪酸钙中的脂肪酸比油脂中的脂肪酸更易于吸收，而其中的钙比无机钙更易于吸收，即脂肪酸钙的生物利用率高于脂肪，可显著提高产蛋性能[8]。与油脂相比，脂肪酸钙的价格更低，可节约生产成本；脂肪酸钙为固体粉状物，便于保管和运输，可直接按比例与其他饲料原料进行混配，尤其适合饲料加工厂和个体养殖户使用[9]。所以脂肪酸钙是一种理想的高能量饲料添加剂，具有良好的推广应用前景。
2. 研究的基本内容和问题
本试验通过考察油脂及脂肪酸钙添加对蛋鸡产蛋生产性能、蛋品质和脂质代谢的影响，探讨提高蛋鸡产蛋性能和蛋品质的营养手段。
3. 研究的方法与方案
1 实验设计
1.1实验动物
采用252羽47周龄海兰褐蛋鸡，采用单因子设计，根据产蛋率随机分为3个组，每个组7个重复，每个重复12羽，分别为大豆油组（2%，对照组）、大豆油 脂肪酸钙组（1% 1%，50:50）、脂肪酸钙组（2%）。预试期4天，正式试验为8周。饲养期间室内温度保持在25℃，湿度保持在55 ~ 65%。预试期4天，正式试验为8周。试验期间自由采食并通过乳头式自动水线自由饮水，记录每周的采食量。
1.2试验日粮
试验用基础饲粮为玉米－豆粕型饲粮，基础日粮组成及营养水平见表1。试验期间人工添料、试验鸡自由采食、自由饮水。
表1 海兰褐蛋鸡日粮组成及营养水平
| 组成（%） | 大豆油组 | 大豆油 脂肪酸钙（50:50） | 脂肪酸钙组 |
| 玉米GB2 | 59.25 | 59.25 | 59.25 |
| 豆粕43% | 23.00 | 23.00 | 23.00 |
| 石粉 | 8.00 | 8.00 | 8.00 |
| 预混料 | 5.00 | 5.00 | 5.00 |
| 大豆油 | 2.00 | 1.00 | 0.00 |
| 脂肪酸钙 | 0.00 | 1.00 | 2.00 |
| 载体 | 2.75 | 2.75 | 2.75 |
| ME（Mkal/kg） | 2.62 | 2.62 | 2.62 |
| Cp (%) | 14.79 | 14.79 | 14.79 |
| Lys (%) | 0.75 | 0.75 | 0.75 |
| Met (%) | 0.32 | 0.32 | 0.32 |
| M C (%) | 0.56 | 0.56 | 0.56 |
| Thr (%) | 0.57 | 0.57 | 0.57 |
| Ile (%) | 0.60 | 0.60 | 0.60 |
| Ca (%) | 3.87 |
|
|
| tP (%) | 0.50 | 0.50 | 0.50 |
| aP (%) | 0.26 | 0.26 | 0.26 |
注：1%蛋鸡预混料为每千克日粮提供1%，配方为：维生素A 10800 IU；维生素D3 2700 IU；维生素E 27 mg；维生素K 0.84 mg；维生素B1 0.72 mg；维生素B2 5.4 mg；维生素B3 9 mg；维生素B5 36 mg；维生素B6 2.7 mg；维生素B11 0.24mg；维生素B12 0.009mg；Biotin 0.09 mg；Cu 8 mg；Fe 100 mg；Mn 100 mg；Zn 100 mg；Se 0.3 mg。
1.3样品采集与制备
在第8周试验结束时，于每个组随机抽取10只鸡，称重后放血处死，肝素钠抗凝管采血，3000 rpm离心10 min制备血浆，置于- 20℃冰箱保存备用。蛋鸡屠宰后，根据实验需要采集样品，生理盐水冲洗，滤纸吸干，编号入塑料袋迅速置冰箱保存备用。试验结束每组随机抽取45枚蛋并标记4℃保存，用于后期蛋品质及蛋黄营养指标的检测。
2 实验测定指标
2.1蛋鸡生产性能指标
试验期间分别记录每天每个重复的采食量和剩余饲料重，并记录产蛋数、蛋重、卵蛋数及破蛋数及死亡情况，试验结束计算8周蛋鸡的平均采食量（ADFI）、平均蛋重（g）、料蛋比（g / g）及产蛋率（%）。
2.2 鸡蛋蛋品质指标
蛋壳强度用蛋壳强度测定仪 （WW-2A，Nanjing Soil Instrument Factory Co.，Ltd，Nanjing，China）检测，蛋壳强度是指蛋碰撞或挤压时的承受能力（单位为kg/cm2），是反应蛋壳质量的重要指标。
分别取鸡蛋大头、小头和中间部分蛋壳（剔除壳膜），用螺旋测微仪分别测其厚度，再取三点平均值，即为蛋壳厚度。用多功能蛋品分析仪（EMT-5200，Robotmation Co. Ltd.，Tokyo，Japan）测定蛋壳指数、蛋白指数、蛋黄指数、蛋白高度、蛋黄颜色及哈夫单位。
2.3 血液生化指标
采用全自动生化分析仪（Hitachi7020，Tokyo Japan）测定谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）、葡萄糖（GLU）、碱性磷酸酶（ALP）、总甘油三脂（TC）、总胆固醇（CHOL）、高密度脂蛋白胆固醇（HDLC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDLC）等血液生化指标。所有指标所用试剂盒均购自四川迈克生物公司。钙（Ca）及磷（Pi）测试盒购自南京建成生物工程研究所，操作按说明书进行。
2.4 蛋黄脂肪酸组成
（一）前处理过程
（1）称取1 g左右样品，加入10 mL乙醚，振荡30 min，10000 r/min离心15 min，转移上清液至脂化瓶中，40℃旋转蒸干；
（2）甲酯化：加氢氧化钠甲醇溶液4 mL，30 min；加三氟化硼3 mL，30 min；加正己烷2 mL，7 min。
（3）取上层正己烷10000 r/min，离心10 min，待上机。
（二）上机条件分析
（1）柱温程序如表2。
表2 柱温程序
| 速率℃/min | 温度℃ | 时间 min |
| 0 | 85 | 2 |
| 5 | 165 | 2 |
| 2 | 225 | 40 |
（2）气化室温度：260℃
（3）检测室温度：285℃
通过与标样滞留时间的比较确定未知脂肪酸的含量。结果用单个脂肪酸占总甲基化脂肪酸的百分比表示。
饱和脂肪酸（SFA，saturated fatty acids）包括C 14：0、C 15：0、C 16：0、C 17：0、C 18：0、C 20：0、C 21：0、C 22：0、C 23：0及C 24：0。
不饱和脂肪酸（USFA，unsaturated fatty acids）包括C 14：1、C 15：1、C 16：1、C 17：1、C 18：1 n-9、C18：2 n-6、C 18：3 n-6、C 20：1、C 18：3 n-3、C 20：2、C 20：3 n-6、C 22：1 n-9、C 20：3 n-3、C 20：4 n-6、C 22：2、C 20：5 n-3、C 24：1及C 22：6。
单不饱和脂肪酸（MUFA，total monounsaturated fatty acids）包括C 14：1、C 15：1、C 16：1、C 17：1、C 18：1 n-9、C 22：1 n-9、C 20：1及C 24：1。
多不饱和脂肪酸（PUFA，polyunsaturated fatty acids）包括C 18：2 n-6、C 18：3 n-6、C 18：3 n-3、C 20：2、C 20：3 n-6、C 20：3 n-3、C 20：4 n-6、C 22：2、C 20：5 n-3及C 22：6。
n-6 PUFA包括C 18：2 n-6、C 18：3 n-6、C 20：3 n-6及C 20：4 n-6。
n-3 PUFA包括C 18：3 n-3、C 20：3 n-3、C 20：5 n-3及C 22：6。
2.5 数据统计
所有数据用Means ± SEM即平均值 ± 标准误表示，数据用一般线性模型（GLM）（单因子方差分析）进行分析。数据统计用IBM SPSS Statistics 19 进行，P 0.05 为差异显著，P 0.01表示差异极显著。
4. 研究创新点
1 满足畜牧生产需求，解决实际问题
本试验探讨提高蛋鸡产蛋性能和蛋品质的营养手段，为海兰褐蛋鸡饲养标准的制定提供科学依据，旨在解决蛋鸡养殖和生产中的实际问题。
2 理论与实践相结合，结果符合实际
5. 研究计划与进展
| 日期 | 试验内容 |
| 2018.9 | 预实验 |
| 2018.9-2018.11 | 试验期间分别记录每天每个重复的采食量和剩余饲料重，并记录产蛋数、蛋重、卵蛋数及破蛋数及死亡情况，试验结束计算8周蛋鸡的平均采食量（ADFI）、平均蛋重（g）、料蛋比（g / g）及产蛋率（%）。 |
| 2018.11-2019.3 | 测定鸡蛋蛋品质指标、血液生化指标、蛋黄脂肪酸组成 |
| 2019.4 | 分析数据 |
| 2019.5 | 撰写论文 |
