1. 研究目的与意义
随着医疗技术的不断进步，针对肿瘤的治疗方法也在不断的改进。但目前，绝大多数恶性肿瘤仍然依靠传统的手术、放射治疗、化学药物治疗作为基本的治疗手段。对很多进展性肿瘤，仍无法完全治愈。随着分子生物学等学科的迅速发展，肿瘤的基因治疗相关研究在近20年来取得了诸多进展。但无论是传统治疗还是各种新兴的基因治疗，都有各自的缺陷，单独应用的抗肿瘤效果十分有限。所以，不同的治疗策略联合应用是当下及今后肿瘤治疗研究的趋势。自杀基因疗法虽然是肿瘤基因治疗中颇具前景的治疗策略，也仍有不少缺点。因此，越来越多的学者开始研究自杀基因和其他肿瘤治疗策略的协同作用，或者将不同的自杀基因联合应用，以求取长补短从而获得更大的抗肿瘤效应[1-4]。
本课题将以自杀基因转入癌细胞中，并在癌细胞中催化产生细胞毒物质杀死或抑制癌细胞为设计理念。笔者在研究自杀基因稳转癌细胞时，将利用CD自杀基因为主要使用的自杀基因种类。
自杀基因又称做药物敏感性基因，是指将某些病毒或细菌的基因导入靶细胞中，其表达的酶可催化无毒的药物前体转变为细胞毒物质，从而导致携带该基因的受体细胞被杀死，此类基因称为自杀基因。自杀基因治疗是指利用转基因方法将哺乳动物不含有的药物酶基因转入肿瘤细胞内，该基因表达的产物可以将无毒性的药物前体转化为有毒性的药物影响细胞的DNA合成从而引起肿瘤细胞死亡。因为常以病毒作为载体进行基因转导故称为病毒介导的酶解药物前体治疗。对自杀基因治疗肿瘤的机制的经典看法有两种：其中一种看法认为自杀基因产物将药物前体转化为细胞毒产物从而对肿瘤细胞发挥细胞毒杀伤作用；另一种看法则认为转导种看法则认为转导自杀基因细胞通过旁观者效应对未转导自杀基因的肿瘤细胞发挥细胞毒作用。WeiMX等研究结果表明第二种治疗机制较成熟：非毒性的核苷类似物如阿昔洛韦和更昔洛韦转化为磷酸化物。这一产物能整合到延伸的DNA中，从而抑制DNA合成导致细胞死亡[2-7]。由此可知自杀基因疗法使得整个基因治疗变得相对容易控制，拥有靶向控制的特点。
2. 研究内容和问题
2.1本课题的基本内容
通过以构建CD基因的慢病毒表达质粒载体感染肝癌细胞，使目标基因进入肝癌细胞，最终对稳转肝癌细胞株进行筛选
2.2预计解决的难题
3. 设计方案和技术路线
3.1课题的研究方法
PCR扩增技术；灭菌技术；细胞培养技术；荧光显微镜技术等。
3.2技术路线
4. 研究的条件和基础
超净工作台、高压蒸汽灭菌锅、小型离心机(SORVALL Legend MICRO 17)、PCR 仪（Applied Biosystems2720 Thermal Cycler）、摇床（Thermo Forma Orbital Shaker）、细胞房，分子生物学和遗传学知识和实验技能。
