1. 研究目的与意义
研究内容：1.采用雷公藤甲素，建立小鼠肝损伤体内模型，研究肝损伤特点及主要影响的核受体和代谢酶。
2.研究三七总皂苷、梓醇配伍对雷公藤甲素诱导肝毒性的防治效应及具体的减毒机制。
研究意义：1.初步阐明核受体-代谢酶在雷公藤甲素肝毒性中的具体作用。
2. 文献综述
雷公藤甲素致肝毒性及减毒机制研究进展[摘要] 中医药在我国已经有数千年的发展历史，随着人们对中医药的研究也越来越关注。
中药临床应用有其显著优点，但是，近些年，诸多临床毒副反应实例和一些新方法新技术研究的结合也表明，某些药物也确实有毒副反应。
雷公藤具有抗炎、免疫调节、抗生育等生物活性，但是对消化、生殖、泌尿、循环系统有较严重的毒性。
3. 设计方案和技术路线
研究方案：1.雷公藤甲素致肝毒性与三七总皂苷、梓醇配伍防治肝毒性效应研究(1) 雷公藤甲素肝毒性效应分析ICR雌性小鼠根据体重随机分为正常对照组、TP（0.8mg/kg）组，灌胃给药进行肝功能指标检测以及病理组织学染色观察，western blot法检测小鼠肝组织PXR 、CYP1A2、CYP3A4、CYP2C9、UGT1A1蛋白水平的表达；采用L-O2细胞，以不同浓度的TP（1.5、3 、6、12、24、48μmol/L）处理，观察细胞形态，进行肝功能指标检测， western blot法检测肝细胞PXR、CYP1A2、CYP3A4、CYP2C9、UGT1A1蛋白水平的表达。
(2)三七总皂苷、梓醇配伍后对雷公藤甲素肝毒性的效应变化ICR雌性小鼠根据体重随机分为正常对照组、TP（0.8mg/kg）组，TP（0.8mg/kg） PNS（112.5mg/kg）组，TP（0.8mg/kg） CAT（10mg/kg），TP（0.8mg/kg） PNS（112.5mg/kg） CAT（10mg/kg）组，灌胃给药，观察其对雷公藤甲素肝毒性的防治效应，检测肝功能水平及病理组织学改变，western blot法检测小鼠肝组织PXR 、CYP1A2、CYP3A4、CYP2C9、UGT1A1蛋白水平的表达；采用MTT法筛选不同浓度PNS、CAT配伍TP(12μmol/L)的最佳减毒浓度，与TP（12μmol/L）配伍，分析配伍后肝功能水平变化，western blot法检测肝细胞PXR 、CYP1A2、CYP3A4、CYP2C9、UGT1A1蛋白水平的表达。
技术路线：
4. 工作计划
2022年1月2022年2月：文献检索，开题材料准备；2022年2月2022年3月：用western-blot法检测雷公藤甲素诱导体内外肝毒PXR、CYP1A2、CYP3A4、CYP2C9、UGT1A1蛋白水平的表达；2022年3月2022年4月：分析三七总皂苷、梓醇配伍减轻雷公藤甲素肝毒性的防治效应；2022年4月2022年5月：针对三七总皂苷、梓醇配伍减轻雷公藤肝毒性的具体机制进行研究，通过western-blot方法检测其所调控的相关代谢酶、核受体蛋白水平的表达；2022年5月2022年6月：整理数据，撰写论文。
5. 难点与创新点
1、从核受体-代谢调控角度着手，研究三七总皂苷、梓醇配伍减毒作用及分子机制，多学科理论与方法交互渗透。
2、以调节内外源代谢的核受体为着眼点，从核受体-代谢调控网络的角度探索组分配伍减毒的分子机制，为临床合理用药提供科学依据。
