1. 研究目的与意义
据记载川续断具有补肝肾,强筋骨,续折伤,止崩漏的功效。
现代研究表明川续断具有增强免疫功能、抗衰老、抗骨质疏松等药理作用,在查阅相关文献资料与报道后,本论文通过分别给药SD大鼠生续断和酒续断水提液,借助色谱技术与计算机数据分析,测定血浆及组织中续断活性成分的浓度变化规律,进一步阐明续断体内代谢规律及药理作用机制并对对中药传统理论赋予现代科学的解释。
2. 文献综述
续断化学成分药理作用及药代动力学研究进展
药学院 12中药 任玉超
[摘 要] 本文主要从川续断的炮制工艺、化学成分、药理作用和大鼠体内药物代谢四个方面综述了中药续断的研究进展,为续断的后续研究和开发利用提供了参考。续断含有三萜皂苷类、环烯醚萜类、生物碱类、挥发油类等成分,具有增强免疫功能、抗衰老、抗骨质疏松等药理作用。
3. 设计方案和技术路线
研究方案
一、药代动力学研究
1、健康SD(雄)大鼠12只,随机分成2组,每组6只,给药前12h,禁食不禁水,分别灌服生续断和酒续断水煎液,大鼠口服药物剂量为0.236g/100g。
2、各组分别于给药前和给药后取血,时间点为0、10min、20min、30min、1、2、3、5、7、9、11、24、30h。眼眶后静脉丛取血0.2mL,肝素钠抗凝,13000 r /min离心10 min制备血浆,-20℃保存备用。
3、取大鼠血浆氮气吹干,后溶解进样分析
4、分别进行LC-MS/MS分析其中化学成分。采用DAS2.0软件计算主要药代动力学参数,绘制血药浓度-时间曲线。
二、组织分布
1、健康SD(雄)大鼠(25010g)64只,随机分成8小组,每小组8只,每4小组为一大组共两大组。给药前12h,禁食不禁水,分别灌服生续断和酒续断水煎液,大鼠口服药物剂量为0.135g/100g。各小组分别于时间点0、30min、1h、2h、4h、6h、8h、12h。每小组各处死一只大鼠,取内脏。
2、剥离系膜组织等并用生理盐水洗净脏器表面,滤纸吸干水分后称重。将脏器剪碎,加入2倍量娃哈哈饮用纯净水匀浆。准确吸取200ml各内脏匀浆液置于10mL具塞的离心管中,涡旋l0s加入3mL乙醚,涡旋30s混匀后,200r/min ,震摇l0min,12000r/min离心5min,取上清液氮气40℃加热吹干,残渣用100mL甲醇溶解,12000r/min,离心2min,取l0uL上清进样。
3、分析化学成分,计算相关参数。
生续断 |
酒续断 |
技术路线
| 血浆、组织成分定量 |
| 计算效应成分药物代谢动力学参数 |
| SD大鼠灌胃水提液 |
| 方法学考察 |
4. 工作计划
2022/2/21-2022/3/7前期查阅国内外相关文献收集资料,SD大鼠及相关试剂实验 仪器准备。
2022/3/8-2022/5/16进行大鼠实验。
2022/5/17-2022/6/进行相关数据分析及毕业论文撰写。
5. 难点与创新点
中药中己知的化学成分在体内经过吸收、代谢、分布、排泄等过程其化学成分发生较大变化,产生药效作用的成分可能并不是原成分,且较难测定到原成分的存在。
因此,相较于单纯的体外细胞离体实验,本实验采用大鼠体内药物代谢,对于揭示中药传统理论的现代化解释具有重要意义,对临床用药更具有指导作用。
同时测定续断多个有效成分,并比较生续断与酒续断炮制前后入血成分差异,为阐明续断酒炙机理及体内代谢提供依据。
