1. 研究目的与意义
泽泻为泽泻科植物泽泻Alisma orientalis (Sam.)Juzep.的干燥块茎，于冬季采挖，除去须根及粗皮切片而成。
现行的2015版药典仅对泽泻原药材和生泽泻、盐泽泻两种饮片确立了质量标准，麸炒泽泻同样作为常用饮片，没有对其的规定来控制其质量。
因此选取麸炒泽泻，在泽泻的基础上对其进行质量标准的研究和完善，确立其性状、显微鉴别、薄层鉴别、灰分、水分、浸出物和含量测定的标准，完善江苏省中药饮片炮制规范，保证饮片的安全性和可控性。
2. 文献综述
泽泻炮制过程中萜类成分的分析及药理作用研究进展
泽泻为泽泻科植物泽泻Alisma orientalis (Sam.)Juzep.的干燥块茎，于冬季采挖，除去须根及粗皮切片而成。具有利水渗湿，泄热，化浊降脂等功效，主要用于治疗小便不利、水肿胀满、泄泻尿少、痰饮眩晕、热淋涩痛、高脂血症。[1]现代研究表明泽泻通过抗血栓形成、降低血脂、降低血浆黏度、抑制动脉粥样硬化的作用，达到抗动脉粥样的功效，起到延缓衰老，防病延年的目的；同时泽泻还具有利尿、解痉、保肝、抗炎、免疫调节、降血糖作用。[2]
研究发现的泽泻中的化学成分已达百种，包括倍半萜和二萜类成分，还含有挥发油、生物碱、黄酮、淀粉、磷脂、蛋白质、多糖以及一些无机元素，[3]主要成分为原萜型四环三萜类化合物，即泽泻醇类化合物，药理研究也证实泽泻中的泽泻醇类成分具有较好的药理活性。本文选取四种泽泻醇类成分泽泻醇A，泽泻醇B，23-乙酰泽泻醇B,24-乙酰泽泻醇A，对它们在泽泻炮制前后成分转化、含量测定以及药理作用等方面进行整理。
1.炮制前后泽泻四种萜类成分变化
1.1炮制沿革
泽泻的炮制自古就有，如酒制就是文献记载最早最多的方法，有酒浸、酒蒸、酒洗、酒炒。酒制之外，以前还有炒法、清蒸、盐制、米泔浸、皂角水浸焙等等。发展到现代，有润切、蒸切、清炒、酒炙、土炒；而现在临床应用最广泛的泽泻饮片是生泽泻、盐泽泻、麸炒泽泻。[4]
1.2炮制方法
泽泻饮片的炮制方法：取原药材，除去杂质，稍浸，润透，切厚片，干燥。盐泽泻炮制方法：取净泽泻饮片，加入盐水拌匀，闷润，待盐水被吸尽后，置炒制容器内，用文火加热，炒至微黄色，取出，放凉。（每100kg泽泻片用食盐2kg。） 麸炒泽泻：将麸皮撒入热锅中，用中火加热，待冒浓烟时投入泽泻片，不断翻炒，炒至药物呈黄色时取出，筛去麸皮，放凉。（每100kg泽泻片用麸皮10kg。）
1.3炮制前后四种萜类成分的变化
药典中泽泻药材以及生泽泻、盐泽泻饮片都以23-乙酰泽泻醇B的含量作为定量指标衡量质量是否合格，因为23-乙酰泽泻醇B是含量最多的成分，同时有研究表明，大多数泽泻三萜类化合物的生源途径都是由23-乙酰泽泻醇B衍生而来。[5]23-乙酰泽泻醇B的24,25环氧键开环可生成24-乙酰泽泻醇A,23-乙酰泽泻醇B和24乙酰泽泻醇A去酰化可分别生成泽泻醇B和泽泻醇A，如图1。[3]
图1 四种萜类成分转化示意图
郑云枫等人研究结果显示，泽泻药材中四种主要成分含量的变化如表1.
表1 炮制前后泽泻四种萜类成分含量变化
作者推测，泽泻原药材中三萜类成分主要为23-乙酰泽泻醇B和少量24-乙酰泽泻醇A，在不同温度条件下炮制23-乙酰泽泻醇B会产生不同的转变途径，如图2.
图2 泽泻中三萜类成分在炮制中的转化途径
作者认为，氧环开裂的过程比脱乙酰基更为容易, 即23乙酰泽泻醇B向24-乙酰泽泻醇A的转化和泽泻醇B向泽泻醇A的转化更容易，这也解释了在盐泽泻及麸炒泽泻饮片中, 23-乙酰泽泻醇B的量与泽泻药材中相比大幅降低, 24-乙酰泽泻醇A和泽泻醇A的量则显著提高, 泽泻醇B的量增加不明显。[6]
曹柳等人[7]选用生泽泻饮片以及清炒泽泻、盐泽泻、麸炒泽泻进行四种萜类成分的含量测定实验，结果如表2.
表2 三种炮制品与生品四种萜类成分含量的比较
从表中可以看出，他们的研究结果中麸炒泽泻中23-乙酰泽泻醇B的含量是增加的。戴小欢等人[8]检得，经麸炒炮制后， 23-乙酰泽泻醇B的含量也是增加。各位学者的实验结果稍有出入，尤其是关于麸炒泽泻是否能使23-乙酰泽泻醇B的含量增加这一点，这应该与麸炒的炮制工艺也有关。
1.4 麸炒炮制工艺研究及炮制作用
王新功等以泽泻醇B醋酸酯（即23-乙酰泽泻醇B）为定量指标研究了麸炒炮制工艺，结果显示，麸炒泽泻最佳炮制工艺为每100kg药材用麦麸皮12.5 kg，温度160～170℃ ,炒制3min,取出,筛去焦麦麸,晾凉。在该最佳条件下制备的麸炒泽泻中23-乙酰泽泻醇B的煎出量比生品提高了13.54%。[9]
谢一辉等人[10]对药典法盐泽泻、樟帮法麸炒盐泽泻和樟帮法麸炒泽泻进行炮制工艺的优化并比较，结果显示三种炮制方法的工艺稳定性存在差异，三者比较麸炒泽泻最优；灰分，饮片色度差和饮片色泽均匀性也以麸炒泽泻为最优。
因此，只要麸炒的炮制工艺得当，是可以使23-乙酰泽泻醇B等四种萜类成分的含量增加的，同时加入麦麸可以使饮片受热均匀，麦麸产生的烟雾也有利于使饮片迅速变成金黄色，提高工艺的稳定性。
2.同时测定泽泻萜类成分的含量
2005年版的药典尚未建立泽泻的含量测定方法，2010和2015版药典只规定了高效液相色谱法测定23-乙酰泽泻醇B的含量：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水（73 : 27)为流动相；检测波长为208nm。因为泽泻中具有药理活性的成分众多，因此有不少学者试图建立新的方法以便同时测定出多种泽泻成分的含量，并不断更新改进现有的方法。现将不同方法下对于四种成分的检出限整理如下表3。
表3 不同方法下四种成分的检出限（μg/ml）
从表中可以看出，普通高效液相色谱法配合蒸发光散射检测器（ELSD）时，对这几种成分的检出限高，灵敏度低；配合紫外检测器(UV)或二极管阵列检测器(DAD)时，灵敏度有所提升，而采用快速高效液相法（UFLC）对四种成分的灵敏度都很高。而且普通高效液相色谱法检测时间过长，四种成分完全出峰需要30~50分钟，而UFLC法测定，四种成分可以在14分钟内全部检测出，分析效率明显提高，因此，快速高效液相色谱法应该是最优秀的检测方法。
各种高效液相色谱法是文献中选用最多的定量测定的方法，除此之外，还有学者采用薄层扫描法测定了泽泻醇B的含量。[17]、[18]
3.泽泻四种萜类成分的药理作用及比较
3.1萜类成分药理作用
泽泻具有利尿、降血糖血脂及抗动脉粥样硬化、抗肾结石形成、抗肾炎活性、抗脂肪肝、免疫调节的作用及对心血管系统的作用。对泽泻的药理作用进行研究和概述的文献很多，但专门对这四种成分的作用进行探索的文献并不多，现将从文献中整理出四种成分对应的药理作用及比较归纳如表4。
表4 四种萜类成分及其药理作用
23-乙酰泽泻醇B | 24-乙酰泽泻醇A | 泽泻醇A | 泽泻醇B | |
利尿 | [19] | [19] [20] | ||
降糖 | [21] | [21] | [21] | [21] |
降胆固醇 | [22] [23] | [22] [23] [24] | [22] [23] | [22] [23] |
降脂 | [24] | |||
抗脂肪肝 | [23] | [23] | ||
降压 | [22] [23] | [22] [23] | ||
免疫抑制 | [25] | [25] | ||
抗肿瘤 | [26] | |||
抗乙肝 | [27] | |||
促线粒体代谢 | [28] |
| ||
抗补体活性 | [2] | [2] |
3.2 与化学药物药理作用的比较
泽泻作为从古沿用至今，且其效用都获得验证和认可的传统中药，笔者将它的药理作用与单一成分的化药、西药略作比较：24-乙酰泽泻醇A的利尿作用比起双氢氯噻嗪较弱[19]；23-乙酰泽泻醇B的降血脂作用不如洛伐他汀[24]；泽泻水提物、醇提物对小鼠的降脂作用在多数指标上不如辛伐他汀[30]；在对改善原发性糖尿病大鼠空腹血糖方面，格列齐特的作用强而且快，但泽泻组大鼠的耐糖量和体质量都有改善[31]；高剂量泽泻提取物对四氧嘧啶小鼠糖尿病模型的降血糖作用与苯乙双胍类似，且对胰岛有一定的保护作用。[32]
这也体现了中药与西药的差别：西药成分单一，靶点单一，对症治疗，见效快；中药多成分多靶点，治疗作用广泛，更偏向于从根本上整体地提高患者的健康状态，但作用比较缓慢。
4.小结
泽泻的萜类成分虽然以23-乙酰泽泻醇B为主，但各自都具有一些不同的生物活性，而且对其的研究和利用都不完全，广大学者和专家可以进一步对此进行探索，争取将每一味药的每一个成分都物尽其用。同时，我们可以看出，单一地以23-乙酰泽泻醇B的含量作为衡量泽泻是否合格的指标并不完善；而且，以单一成分作为定量标准也与传统的中医药理论相违背。如今我们的中医药事业已经得到极大的发展，在技术可以支持的现今，我们可以提倡从单一成分向有效成分群过渡，这既是对传统中医药理念的传承，也是一种创新。
参考文献：
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3. 设计方案和技术路线
1.收集不同产地和厂家的麸炒泽泻饮片；对其外观性状进行比较和描述。
2.鉴别：（1）显微鉴别（2）薄层色谱鉴别：观察供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，是否显相同颜色的斑点。
3.检查：
4. 工作计划
2022.1-2022.2 文献调研、撰写综述
2022.2-2022.3 实验前准备及预实验
2022.3-2022.5 实验研究
5. 难点与创新点
泽泻的炮制规范中没有对麸炒泽泻的规定，本研究可以完整、规范地对其性状、鉴别、检查、含量测定制定质量标准。2015版药典中，泽泻以23-乙酰泽泻醇B的含量作为测定指标，但由于炮制会使23-乙酰泽泻醇B成分发生转化，而且其他成分也具有很丰富的药理活性，因此本研究提出同时测定麸炒泽泻中23-乙酰泽泻醇B、24-乙酰泽泻醇A、泽泻醇B和泽泻醇A四种成分的含量，并考虑可以根据结果增加一个或数个成分作为麸炒泽泻含量测定的定量指标。
选用UPLC同时测定泽泻中四个成分的文献报道并不多，但其分析效率和灵敏度都比HPLC和TLCS高，基于此本研究还将新建立一个方法来同时测定这四个成分的含量。
