石上柏抗肿瘤有效部位的初步研究开题报告

 2022-12-27 11:32:20

1. 研究目的与意义

(1)内容:1)石上柏药材化学成分的分离、提取;2)高效液相分析、制备化合物;3)提取物、单一成分的药理作用研究(抗肿瘤、抗氧化等);4)MTT法检测细胞活性的研究(2)意义:恶性肿瘤是威胁人类健康的重要疾病之一,2015年,肿瘤为仅次于心血管疾病的全球第二大死因,同时也是造成全球范围內疾病负担的重要原因。

根据世界卫生组织癌症研究机构数据,2012年全球恶性肿瘤新发病例超过1400万,死于恶性肿瘤人数约800万,是世界范围内主要死因。

虽然近年来针对恶性肿瘤的治疗和预防取得了重大进展,但是由于人口数量増长和人口老齡化,加之吸烟、肥胖和饮食结构改变等危险因素,恶性肿瘤疾病负担仍然会不断増加。

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2. 文献综述

石上柏化学成分及药理作用的研究进展华 曦(南京中医药大学,江苏,南京,210023) 摘 要: 石上柏是卷柏属植物之一,具有良好的药用效果,特别是抗癌作用。

研究表明,石上柏含双黄酮、生物碱、木脂素、甾醇、有机酸等化合物。

文章就国内外对石上柏的化学成分及其药理作用研究进行综述,为开发利用有药用价值的天然产物提供科学依据,同时对其有效成分或有效成分群的研究,也为后续进行质量标准控制的研究提供物质理论基础。

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3. 设计方案和技术路线

(1)拟采取的研究方案:1)药材采收、净制、晒干及粉碎;2)药材的提取、粗分离,得到有机溶剂的萃取物;3)提取物柱层析分离;4)提取物的薄层鉴别,解析提取物的化学结构;5)有效成分进行药理、细胞实验验证有效性(2)技术路线:药材提取分离→柱层析分离→各组份薄层鉴别、各组份高效液相分析→制备型高效液相纯化→化合物波谱测试及结构解析、化合物体外抗肿瘤活性研究

4. 工作计划

(1)2022年1月6日~2022年1月13日药材购买、鉴定,同时查阅相关文献,初步设计实验方案及预期结果(2)2022年1月14日~2022年2月8日药材的提取、粗分离,得到有机溶剂的萃取物(3)2022年3月2日~2022年3月5日提取物的体外抗氧化、抗肿瘤活性研究(4)2022年3月6日~2022年3月14日柱层析分离,得到不同浓度梯度的流分,各流分的薄层色谱分析,明确接下来要纯化哪些主要斑点对应化合物(5)2022年3月15日~2022年3月21日根据TLC分析结果,对主要流分进行RP-HPLC分析,进一步明确纯化哪些色谱峰对应化合物及后续的分离、纯化策略(6)2022年3月22日~2022年3月29日一些流分的制备型高效液相色谱纯化,分离得到高纯度化合物(7)2022年3月31日~2022年4月7日化合物测试核磁共振氢谱、碳谱、高分辨率质谱,解析鉴定化合物的化学结构(8)2022年4月8日~2022年4月24日化合物的体外抗肿瘤活性研究,MTT法研究化合物体外对肿瘤细胞株的抑制作用。

(9)2022年4月25日~2022年4月30日整理实验结果及分析处理(10)2022年5月4日~2022年5月20日撰写论文

5. 难点与创新点

(1)在前人的基础上进一步全面研究石上柏化学成分的多样性;以体外活性筛选为导向,对石上柏活性成分进行制备型分离。

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