1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
1、本课题的意义:
研究BnEXPA4基因在甘蓝型油菜中的表达规律,对于研究膨胀素基因表达与甘蓝型油菜矮化性状之间的关系,具有重要的生物学意义。
2、国内外研究概况:
2. 研究的基本内容和问题
1、研究目标:
油菜BnEXPA4基因的克隆及表达分析
2、研究内容:
3. 研究的方法与方案
以南京农业大学农学院油菜组保存提供的甘蓝型油菜cv.NJ7982为供试材料,取开花期不同组织的材料,采用TRZOL法提取RNA,反转录合成cDNA,设计引物,建立反应体系进行PCR扩增。用荧光定量 PCR扩增,测定BnEXPA4基因在甘蓝型油菜不同组织中的表达水平,用激素诱导表达分析BnEXPA4基因与激素调控的联系,而研究植物膨胀素蛋白基因在甘蓝型油菜中的表达规律,为研究膨胀素基因表达与植物矮化性状之间的关系奠定基础。
本实验所涉及的研究方法,在国内外已经有相当成熟的理论基础和技术基础。通过查找文献和资料,在老师的指导下,完全可以掌握全套的实验方法。本实验所用器材,均是学校实验室现有器材,实验材料、试剂,都由实验室提供。本实验要求对基因克隆,凝胶电泳等技术有比较细致的了解,能够通过对已有文献的学习和已有技术的研习,利用大学期间所学知识,掌握实验方法。所以,本实验完全可行。
4. 研究创新点
膨胀素被认为在植物生长发育过程中起着重要作用,较早实验证明膨胀素的表达可以调节植物生长,特别是膨胀素的时间和空间的表达对表现型有很大的影响。目前,研究者在不同种属植物中已作了大量的基因克隆,深入研究膨胀素的基因家族、结构特性、细胞壁伸展的机制,新的膨胀素基因的克隆以及基因表达的研究加深了人们对这类细胞壁松弛蛋白潜在功能的认识。
尽管有关膨胀素已有一些研究,但关于膨胀素对植物矮化发育的直接影响报道甚少。因此,研究植物膨胀素蛋白基因在甘蓝型油菜NJ7982中的表达规律,对于研究膨胀素基因表达与植物矮化性状之间的关系,具有重要的生物学意义。
5. 研究计划与进展
2014年7月:设计引物,克隆基因;
2014年8月-2014年9月:材料RNA的提取,cDNA合成,RT-PCR引物设计;
2014年9月-2014年10月:基因表达分析。
