1. 研究目的与意义
芍药苷，来源于毛莨科植物芍药根、牡丹根、紫牡丹根。目前，芍药苷作为芍药总苷的主要成分，已经被科研工作者所重视，并发现芍药苷具有显著的药理药效作用，例如，降血糖作用、免疫调节作用、抗肿瘤作用以及对中枢神经系统的作用等。
通过查阅相关文献，了解了芍药苷作为中药单体的理化性质及药理作用，如降血糖、抗肿瘤、解热等作用。同时，分析了目前热门靶位点筛选方法，并采用DARTS作为筛选方法，筛选出芍药苷靶蛋白。DARTS是一个通用的方法识别和研究蛋白质-配体相互作用。这项技术是基于这一原则,当一个小分子化合物与蛋白质结合后,相互作用稳定了靶蛋白质的结构，使得其成为蛋白酶抗性。靶蛋白是特别有用的初步鉴定蛋白质小分子的目标,但也可以用来验证潜在蛋白质-配体相互作用，预测或以其他方式确定并评估相互作用的亲和力。该方法简单有利,因为它可以执行使用原油细胞溶解产物和其他复杂蛋白质混合物(无需纯化蛋白质)，并使用天然、未修改的小分子。
本实验比较芍药苷处理过的肺癌细胞和正常细胞的差异，观察细胞变化。然后，DARTS法分析筛选出靶蛋白以完成实验。
2. 文献综述
以DARTS法筛选芍药苷靶位点的研究
生物制药112班047111246虞旭彬
摘要：本文在查阅文献的基础上，综述了芍药苷作为中药单体的理化性质及药理作用，如降血糖、抗肿瘤、解热等作用。同时，分析了目前热门靶位点筛选方法，并采用DARTS作为筛选方法，最后概述了DARTS。
3. 设计方案和技术路线
研究方案
1.检测芍药苷处理肺癌细胞的活性
培养肺癌细胞株，在细胞丰度达80-90%时，用不同浓度芍药苷处理细胞，以未处理的细胞为对照，MTT法检测诱导肺癌细胞凋亡的浓度，显微观察细胞变化。
4. 工作计划
2022年1月5日~2022年3月13日查阅相关资料，对实验条件进行优化，设计实验方案，并完成开题报告。
2022年3月14日~2022年5月1日实验操作，筛选药物候选靶蛋白。
2022年5月2日~2022年6月9日实验总结，归纳，完成毕业论文。
5. 难点与创新点
靶蛋白的筛选是中药有效成分活性检测，甚至活性成分筛选的重要实验技术。然而相关的研究方法还不能有效进行，因而本项目采用DARTS进行亲和筛选，因为此方法对蛋白质结构及蛋白质与药物结合影响很小。该方面研究在技术上具有创新性。
