1. 研究目的与意义
内容:
1.酪醇调节肺癌细胞与正常细胞活性的差异比较,通过MTT法检测细胞生长变化。
2.DARTS法实验、筛选酪醇调节肺癌细胞或正常细胞的靶蛋白。
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2. 文献综述
酪醇调节肺癌细胞与正常细胞活性及DARTS法筛选靶蛋白
生物制药047111247周晨彤
摘要:大量研究表明,红景天苷元酪醇以及橄榄羟基酪醇对肝、肠道肿瘤增值生长有抑制作用。但我们初步研究发现,一方面,酪醇能抑制肺正常细胞活性,促进肺癌细胞活性;另一方面,酪醇能够抑制十字孢碱诱导的肺正常细胞凋亡,但并不抑制十字孢碱诱导的肺癌细胞的凋亡。DARTS提供了一种前所未有的能力去确定小分子的靶蛋白,可以用来研究多靶点药理学以及复方药物(如中药),本文以DARTS法研究酪醇对肺癌细胞A549及正常细胞Beas活性的差异调节。
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3. 设计方案和技术路线
研究方案:
1.检测酪醇处理肺癌细胞的活性
培养肺癌细胞株,在细胞丰度达80-90%时,用不同浓度酪醇处理细胞,以未处理的细胞为对照,MTT法检测细胞毒性,流式细胞仪分析观察细胞的凋亡程度。
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4. 工作计划
2022年1月5日-2022年2月10日查阅资料,初步试验,对实验条件进行优化;
2022年3月1日-2022年3月13日查阅报告,完成开题报告;
2022年3月14日-2022年5月1日实验操作,筛选药物候选靶蛋白;
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5. 难点与创新点
靶蛋白的筛选是中药有效成分活性检测,DARTS提供了一种前所未有的能力去确定小分子的靶蛋白,可以用来研究多靶点药理学以及复方药物,因而本项目采用DARTS进行亲和筛选,因为此方法对蛋白质结构及蛋白质与药物结合影响很小。该方面研究在技术上具有创新性。
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