1. 研究目的与意义
内容:了解重组人白介素-2的构成以及主要应用。
学习了重组人白介素-2原液的蛋白质含量检测方法。
分析研究了福林酚法测定重组人白介素-2的蛋白质含量的可行性。
2. 文献综述
重组人白介素-2原液蛋白质含量检测分析方法文献综述摘要:白介素-2作为一种免疫调节的细胞因子。
能够促进B细胞的增殖和分化;促使T细胞的快速增殖;可以对NK细胞进行诱导实现其分化以及增殖。
目前市售的白介素-2主要以基因工程表达的重组人白介素-2为主;生产工艺主要以基因工程菌为基础,利用生物发酵法配合大规模的分离纯化技术,得到高纯度的重组人白介素-2,制成重组人白介素成品。
3. 设计方案和技术路线
研究方案:通过建立实验方法探究蛋白质含量测定法(LOWRY法)适用于重组人白介素-原液的蛋白质含量检测。
实验原理:本法系根据蛋白质分子中含有的肽键在碱性溶液中与CU2 螯合形成蛋白质-铜复合物,此复合物使酚试剂的磷钼酸还原,产生蓝色化合物,同时在碱性条件下酚试剂易被蛋白质中铬氨酸、色氨酸、半胱氨酸还原成蓝色反应,在一定范围内其颜色深浅与蛋白质浓度呈正比,以蛋白质对照品溶液做标准曲线,采用比色法测定供试品中蛋白质的含量。
技术路线:检验方法:1、检验用溶液配制 2、对照品溶液的制备 3、供试品溶液的制备 4、检测 5、结果判定确认项目:专属性,重复性,线性,精确度、范围,耐用性
4. 工作计划
2022年2月:确定论文方向及课题;2022年3月:线上及线下搜集相关资料;2022年4月:进行初步实验;2022年5月:诼步完成实验,整理实验数据,进行论文初稿设计;2022年6月:进行一系列修改,完善论文。
5. 难点与创新点
通过文献的查阅以及实验的操作确认蛋白质含量测定法(福林酚法)适用于重组人白介素-2的蛋白质检测。
《中国药典》2015年版三部通则0731蛋白质测定法第二法福林酚法适用于重组人白介素-2原液的蛋白含量检测。
清楚认识到蛋白质含量测定方法的规范化的必要性。
