重组人角质生长因子-2纯化工艺探索开题报告

 2023-01-05 21:18:30

1. 研究目的与意义

内容:本实验的设计主要以离子交换层析,亲和层析和超滤等一系列层析步骤,以得到更高纯度的KGF-2。

主要内容有:1 阅读文献资料,对比实验方法,总结优缺点,针对KGF-2本身性质优化实验方案。

2熟悉影响蛋白稳定性的因素,如缓冲液的浓度,酸碱度,以及温度,对其中因素做出猜想,进行微调是否能得到更纯的原液。

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2. 文献综述

重组人角质生长因子-2纯化工艺探索王莹 120202105【摘要】:本文研究重点在于通过离子层析,亲和层析,凝胶层析等一系列提纯手段来得到稳定的的更高活性的KGF-2蛋白纯品。

实验过程中以紫外分光光度法,电泳法以及高效液相色谱法等检测方法来对样品的纯度进行记录和分析。

【关键词】:重组人角质生长因子-2;纯化;离子层析法;亲和层析法;凝胶层析法;紫外分光光度法;电泳法;高效液相色谱法1重组人角质生长因子-21.1 KGF-2简介角质细胞生长因子2,又称为成纤维生长因子,是成纤维生长因子家族的成员之一。

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3. 设计方案和技术路线

4. 工作计划

2022.01-2022.02 熟悉蛋白纯化仪,超滤系统,离心机,抽滤机,烘箱,PH计等仪器的使用及原理,掌握配液的基本操作技能与注意点。

2022.03阅读大量文献,进行资料的归纳与整理,制定实验方案,完成开题报告及综述;提升自身完成实验的能力,做好做课题实验的充分准备。

2022.04根据方案完成试验,整理数据,撰写论文。

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5. 难点与创新点

层析方法的选择异于传统 翻阅文献,发现目前的研究现状KGF-2的纯化线路如下,SP层析→Heparin层析→凝胶过滤。

由于凝胶层析是以物质分子量的不同作为分离依据的,分子量的差异仅表现在流速的差异上,所以分离时流速必须严格把握。

因而分离操作一般较慢。

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