1. 研究目的与意义
内容: 在24只BALB/c小鼠右侧背部皮下接种5x105CT-26细胞,定期观察肿瘤生长情况,待肿瘤生长至平均体积100mm3时根据肿瘤的大小和小鼠体重随机分成两组,给药组12只和对照组6只,分组后的剩余老鼠安乐死。
然后按方案进行实验,根据实验数据分析PD-1对小鼠结肠癌的抗肿瘤作用。
意义:评价测试药物aPD-1(RMP1-14)在小鼠结肠癌CT-26细胞株异种移植小鼠动物模型中的抗肿瘤作用,为研制该抗体药物应用于临床提供参考。
2. 文献综述
PD-1对结肠癌的表达的研究进展摘要:结肠癌是消化系统最为常见的恶性肿瘤之一,占胃肠道肿瘤的第三位,近年来国内统计发现结肠癌的发病率及死亡率呈现较为明显的上升趋势。
其治疗手段以手术为主,同时有 目的的结合放疗和化疗[1],然而这治疗方法存在疗效低,药物毒副作用大,治疗后耐药等不足。
21世纪,抗肿瘤药物市场发生着重大的变化,抗肿瘤抗体药物异军突起,单克隆抗体药物以其独特的作用机制及高效性,在恶性抗肿瘤的治疗中发挥了不可估量的作用。
3. 设计方案和技术路线
实验设计:每组的动物数及详细的给药途径、剂量和方案见下表表1CT-26动物模型中的给药途径、剂量及方案组别 n 给药组 剂量(mg/kg) 给药方式 给药时间1 12 溶媒对照(PBS) -- i.p. 2次/周3周2 6 aPD-1(RMP1-14) 10 i.p. 2次/周3周注:n:动物只数;给药体积为 10 ul/g; i.p.:腹腔注射给药。
实验材料:实验细胞种类:小鼠结肠癌细胞株CT-26,实验动物:BALB/c小鼠,由灵畅提供。
性别为雌性,接种细胞时预计小鼠体重范围为18-22g/只实验试剂:PBS(0.5%MC);aPD-1(RMP1-14)实验动物模型的建立:接种细胞浓度:5x105个/只接种体积:0.1ml/只接种部位:右下外侧随机分组:在给药开始前,称量所有动物的体重,并用游标卡尺测量肿瘤体积。
4. 工作计划
2022年2.17~2.20查阅文献,明确结肠癌的现状以及治疗手段2022年2.21~2.28根据查阅的文献和指导老师的指导,完成开题报告并制定实验方案2022年3.5~4.31 根据实验方案进行课题实验2022年5.1~5.20 整理分析实验数据,完成毕业论文
5. 难点与创新点
PD-1是负性免疫调节因子,其在肿瘤细胞的表达在肿瘤的免疫逃逸过程中发挥着重要的作用。
目前,已有多项早期的临床研究提示,抗PD-1药物治疗肿瘤的疗效显著且不良反应小,测试PD-1抗体对小鼠结肠癌的药效为以后该药应用于临床癌症的治疗奠定基础。
同时在小鼠皮下建立肿瘤模型,皮下移植瘤模型有其高的移植成功率、基本一致的生长速率和较小的个体差异,一直被广泛应用于抗肿瘤药物药效等相关方面的研究中,为其提供了实验基础和平台。
