1. 研究目的与意义
内容：1.药物铜配合物对抑制肝癌细胞株增殖活性的筛选。
2.选取对药物最为敏感的细胞株体外培养3检测药物对肝癌细胞株增殖的影响。
4.分析药物对肝癌细胞株增值的影响机制。
2. 文献综述
见附件
3. 设计方案和技术路线
1.药物对抑制肝癌细胞株增殖活性的筛选1.1. 人肝癌细胞株Bel-7402、HepG2、SMMC-7721体外培养，药物作用24h后，MTT法检测细胞增殖，计算半数抑制率IC50，筛选出对药物最为敏感的细胞株，进行机理研究。
1.2. 考察药物对正常肝细胞的毒性作用：人正常肝细胞LO2细胞体外培养，药物作用24h后检测：1）细胞培养上清乳酸脱氢酶LDH的释放，2）细胞培养上清ALT、AST的含量。
2.选取对药物最为敏感的细胞株体外培养，检测药物对肝癌细胞增殖的影响2.1. 光镜下观察细胞形态2.2. Brdu掺入法检测细胞增殖2.3. 流式细胞仪检测对细胞周期的阻滞作用2.4. Western blot检测细胞周期相关蛋白Cyclins、CDKs的表达。
4. 工作计划
3月1日~4月1日：实验方案的设计、原理及基本现象的熟悉、基本操作的熟练掌握4月1日~5月1日：1、人肝癌细胞株Bel-7402、HepG2、SMMC-7721体外培养；2、用MTT法检测细胞增殖，计算IC50，筛选出对药物最为敏感的细胞株；3、就药物对人肝癌细胞株Bel-7402、HepG2、SMMC-7721进行机理研究。
5月1日~6月1日：1、就前期实验得到的对药物最为敏感的细胞株进行体外培养。
2、检测药物对肝癌细胞增殖的影响（形态、数量、周期等进行研究）
5. 难点与创新点
药物Cu[(ttpy-tpp)Br2]Br是一种含线粒体靶向基团三苯基膦（TPP）的铜（II）-三吡啶配合物。
铜（II）-三吡啶配合物能够与DNA稳定结合并具有较高的DNA 切割活性。
该药物是通过嵌入方式及静电作用与DNA稳定结合，且对pBR 322 DNA及细胞提取DNA能有效地实现氧化切割。
