1. 研究目的与意义
1、内容：黄芪对免疫系统的调节作用范围极广，不仅能够调节固有免疫系统，对单核一巨噬细胞、树突状细胞具有激活、刺激及调节作用;也能够调节特异性免疫系统，对免疫器官、T淋巴细胞、B淋巴细胞及多种细胞因子有着广泛的调节作用，可用于治疗过敏性疾病。
Th1/Th2比例失衡是过敏性疾病发生的经典理论，其中Th2细胞是与过敏性疾病关系最密切的淋巴细胞。在不同的细胞因子作用下Th0向Th1或Th2细胞分化并维持一定的平衡比例，保证机体正常的细胞和体液免疫功能。Th1细胞主要分泌IL-2、IL-12和IFN-γ，Th2细胞主要分泌IL-4、IL-5、IL-13等。IL-4和IL-13可以通过嗜酸性粒细胞和B细胞信号通路促进过敏性疾病发生；通过成纤维细胞、气道平滑肌细胞、树突状细胞和上皮细胞可促进气道重构；IL-5则对于B细胞的生存与成熟以及嗜酸性粒细胞的激活至关重要。Th2分泌的细胞因子对嗜酸性粒细胞和B淋巴细胞等的作用，可导致过敏性疾病的特异性炎症过程产生，并介导速发型变态反应。过敏原的持续暴露会促进Th2细胞优势表达，使正常Th1/Th2平衡被打破，引起异常的免疫应答。本文主要就黄芪对斑马鱼免疫系统的影响展开，研究用黄芪给药后斑马鱼体内Th1/Th2比例变化以及嗜酸性粒细胞、中性粒细胞的变化。
2、意义：免疫系统疾病如过敏性哮喘等是严重危害人类健康的常见病，临床发病率高且呈上升趋势。黄芪的免疫活性十分突出，利用其免疫调节作用，在过敏性疾病的临床治疗当中得到有效的应用。黄芪是具有良好免疫增强作用的中药，其具有非特异性和特异性免疫的调节作用，其免疫调节机制较为复杂， 通过检测斑马鱼体内Th1/Th2比例、嗜酸性粒细胞和中性粒细胞的变化，了解黄芪对过敏性疾病的作用，更好地为后续的进一步研究提供理论依据。
2. 文献综述
斑马鱼的现代研究进展
王圆圆
摘要:斑马鱼是近年来用于药学领域研究的热门模式生物，其优势在于化合物的高通量活性筛选及毒性评价。斑马鱼毒性评价模型集成在体动物与体外细胞模型的优势，具有高效、低成本的特点，在国外已成为化合物早期安全性快速甄别的有效模型，国内将斑马鱼模型用于中药毒性研究正日益兴起。综述了斑马鱼在药物毒性研究方面的进展，提出斑马鱼模型在中药毒性研究中的新策略。
关键词:斑马鱼；斑马鱼毒性评价模型；中药毒性；模式生物
3. 设计方案和技术路线
1、研究方案：野生型斑马鱼(Danio rerio)AB品系，养殖于271℃人工海水中，人工海水以反渗透水及海盐配制，电导率550-650，光照周期为14h光照/10h黑暗，喂饲丰年虾，每日2次。雌雄鱼在产卵前一天晚上隔离，第二天清晨光照追尾后收集鱼卵。黄芪中药提取液以人工海水现用现配制，产卵后48h分别将鱼卵置于中药提取液溶液中，空白组以人工海水进行孵育。药物作用24h后，收集空白组及不同浓度药物组处理胚胎，检测其胚胎的免疫学指标。
2、技术路线：
①斑马鱼的养殖
4. 工作计划
2.21-2.27查阅文献，整理资料，对实验内容有一定认识，有初步设想
2.27-3.11完善实验方案，完成开题报告
3.11-5.31 进行课题实验
5. 难点与创新点
利用斑马鱼药物模型研究黄芪对免疫系统的影响具有以下优点：
(1)实验周期短。斑马鱼的胚胎发育期短，一般24-30小时即可得到试验结果。
(2)胚胎透明、易观察。斑马的从胚胎到幼鱼期是透明的，很容易观察其活体状态下药物作用状态。
